摘要：目的探明艾片抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法借助PharmMapper等数据库获得艾片（左旋龙脑）抗脑缺血再灌注损伤（cerebralischemia-reperfusioninjury，CIRI）的潜在靶点并进行基因本体（geneontology，GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（Kyotoencyclopediaofgenesandgenomes，KEGG）通路富集分析。分别设置假手术组、模型组、溶剂模型（1%聚山梨酯-80）组、阳性药（尼莫地平）组及艾片高、中、低剂量（0.20、0.10、0.05g/kg）组，采用预防和治疗给药的方式对线栓法制备的CIRI模型大鼠进行干预，ZeaLonga评分法对不同时间点（再灌注4、22.5、46.5、70.5h）模型大鼠神经功能进行评价；2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride，TTC）染色法观察大鼠脑梗死率；蛋白质印迹（Westernblotting）和免疫组织化学法对预测的通路进行初步验证。结果网络药理学预测显示，艾片抗CIRI的潜在靶点有63个，可能与调控生物过程及叉头转录因子O亚族（forkheadtranscriptionfactoroftheOclass，FOXO）信号通路、磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol-3-kinases，PI3K）/蛋白激酶B（proteinkinaseB，Akt）信号通路、雌激素信号通路等有关。实验结果显示，艾片0.20、0.10g/kg组能极显著降低模型大鼠脑梗死率，显著升高模型大鼠缺血侧皮层中磷酸化叉头转录因子O亚族3a（phosphorylated-forkheadboxO3a，p-FOXO3a）蛋白表达量和p-Akt/Akt和p-FOXO3a/FOXO3a值，极显著降低细胞死亡调解因子（Bcl-2interactingmediatorofcelldeath，Bim）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cysteinylaspartatespecificproteinase3，Caspase-3）蛋白表达量，艾片0.20g/kg组还能不同程度改善模型大鼠各时间点神经功能损伤。结论艾片可能是通过调节Akt/FOXO3a/Bim信号通路改善CIRI，发挥抗细胞凋亡作用。
脑卒中因其高发病率和高死亡率，是造成全球老年人死亡的主要原因[1]，在我国，缺血性脑卒中的发病率占脑卒中的85%[2]，且呈逐年增长和年轻化的趋势[3]，对患者、家庭及社会都带来沉重的负担[4-5]。当前对于缺血性脑卒中的首要治疗原则是尽早重建血液再灌，恢复脑部的血氧供应，临床上主要采用阿替普酶治疗或机械溶栓，但在短时间内恢复血氧供应，很大几率会发生2次损伤，导致脑水肿、脑出血和神经元死亡[1,6]，且溶栓治疗受病理生理窗（pathophysiologicalwindow，PW）的限制[7-9]，故急需新的方法和药物来缓解脑缺血再灌注损伤（cerebralischemia-reperfusioninjury，CIRI）。
艾片（主含左旋龙脑）为菊科植物艾纳香Blumeabalsamifera(L.)DC新鲜叶经提取加工制成的结晶，《中国药典》年版记载其味辛、苦，性微寒，归心、脾、肺经，因辛香走窜的特性，具有良好的开窍醒神功效，兼可清热止痛，常用于治疗热病神昏、中风痰厥[10]。课题组前期研究表明，艾片预防性给药3d可改善CIRI模型大鼠的脑水肿，抑制造模引起的体温升高[11]。但目前关于艾片抗CIRI的具体机制尚未完全清楚，本研究在前期研究的基础上，从网络药理学角度初步预测艾片抗CIRI的可能机制，采用预防结合治疗给药的方式，从分子水平予以验证，探明艾片抗CIRI的通路机制，揭示其“开窍醒神”的科学内涵，为临床使用提供理论及实验依据。1材料与方法
1.1基于网络药理学的机制预测
因艾片成分较单一，故针对其主要成分抗CIRI的机制进行预测。通过PubChem数据库（