脑缺血灶

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TUhjnbcbe - 2021/8/17 9:20:00
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最近总逃不过每逢夜班必有妖的定律。这不,夜班刚一接班,就接到临床打来的电话,追问一个病人的生化结果。刚好同事叫我去看一个结果,原来都是指的同一个病人。于是先回复了临床结果有异常,需再耐心等待。

这是一个神内科患者,患者清晨被家属发现坐在躺椅上呼之不应,四肢无意识运动。既往有高血压、糖尿病及阿茨海默病病史。有脑梗死病史但无明显后遗症。入院意识模糊、失语。入院急查头颅CT示:双侧基底节区及双侧半卵圆中心多发缺血、梗塞灶。

以上为入院检查结果。

CK的值?这个结果可信吗?碰到这种异常结果我们一定要查看反应曲线。

生化的反应曲线是整个生化反应过程的记录,通过查看反应曲线我们可以知道这个结果是否可靠。比如常见的,终点法项目出现负值,速率法项目底物耗尽,试剂是否有问题(位置放反、混加、错加、过期),仪器故障(试剂针加样不足、搅拌棒破损携带污染、搅拌棒打杯、冲洗站滴水、比色杯溢水),光源老化等等,都能在反应曲线上有所体现。

那么,到底怎么去看这个反应曲线呢?

上图,是AU的反应监测界面,左边提供的是发生反应的杯号,搅拌棒号,反应方法,读点的设置,做光校正及试剂空白的日期等,右边则为反应曲线。

反应曲线(reactioncurve),一般来说是以时间为横坐标,吸光度的变化为纵坐标绘制而成的光滑曲线。不同型号的生化分析仪略微有区别,体现在时间和吸光度的单位上。以AU为例,横坐标是读点(point),规定是18s读一个点,总共28个(P0~P27)读点。

那么反应曲线为什么有3条颜色不同的线呢?一般来说,仪器都是用双波长来监测整个反应的,双波长(主波长、副波长)有自身的优势,可以消除一些电压波动的影响因素造成的吸光度不稳的情况,使得两者相减后的曲线较为平直,结果变异减少。蓝色是主波长,绿色是副波长,黑色的是主副波长之差,也就是我们所说的反应曲线。

我们以双试剂的反应曲线为例,聊一下反应曲线上各段的意义。

A段:0点,加入试剂1(R1)

B段:0~1点之间,加入标本S,且搅拌

C段:1~10点之间,为R1+S的孵育时间

D段:10~11点之间,加入R2,且搅拌

E段:11点直至反应结束

在整个检测过程中,试剂1(R1)、样本(S)、试剂2(R2)加入以及搅拌的时间点都是固定的。那么一般正常的反应曲线就要具备:

a.比较平滑,无明显的跳点;

b.加入R2前后吸光度会发生明显的变化(低浓度样本除外);

c.终点法的反应曲线,会有一段曲线的吸光度基本无变化;

d.速率法的反应曲线,基本成一条直线(两点速率法除外)。

目前,生化常用的分析方法主要分为两大类:终点法和速率法。其中终点法细分为一点终点法和两点终点法,速率法细分为速率法A和两点速率法。

终点法:通过测定酶反应开始到反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量,以求出酶活力的方法,亦称平衡法。

常用于:TBIL、DBIL、TP、ALB、TBA、GLU、UA、TC、TG、HDL、CaP、Mg。以上项目,除CaP、Mg基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外,其他测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法。比浊法项目(CYSC、B2MG、IgA、IgG等)等。

速率法:指连续测定(每15s~1min监测一次)酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间的变化来求出酶反应的初速度的方法,即连续监测法。当反应进入零级反应期,此时底物浓度仍处于过量状态,在此阶段产物的增加或底物的消耗达到一个稳定的状态,即单位时间内底物的消耗量或产物的生成量是恒定的,此时的反应速度与底物浓度无关,只与酶活性有关,通过检测这段时间的产物生成量或底物消量来计算出酶的活性。

几乎全部酶类都是用速率法测定,根据反应方向可分为两种,一是吸光度下降反应(测底物消耗):如ALT、AST、HBDH等,二是吸光度上升反应(测产物生成):GGT、ALP、ADA、AFU、CK、LDH、AMY等。

非酶类项目:HCY、TBA(部分厂家采用两点速率法)、BUN(部分厂家采用采用两点速率法)等。

那么,我们回到案例中CK的反应曲线:

CK是采用速率法测定的,从上图可以发现,还没到读点时间,反应曲线就已经飘出去了,超过了试剂盒提供的线性范围,故可以判断为属于底物耗尽问题,应该稀释后重测。稀释重测之后的反应曲线又是什么样的的呢?这个病人的CK值到底是多少?是什么原因导致CK异常升高呢?敬请期待下回分解吧

总结一下:

1.反应曲线是生化反应的总控制,对有疑问或者矛盾的结果,一定要查看反应曲线进行评估。

2.可以在全自动生化仪里面设置数据报警拦截,如果标本出现底物耗尽,则该结果不往LIS里面传输,便于发现异常结果。

3.及时与临床医生沟通,结合病人的情况评估检测报告。

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